Ezio's verhaal begint in de strijd en de verkenning van de open wereld van de Italiaanse Renaissance, gekenmerkt door kunst, rijkdommen en een moorddadige samenzwering. De speler reist naar de grootste stad, Rome, het centrum van macht, hebzucht en corruptie. Ezio neemt de leiding over de gehele broederschap van de Assassijnen. Twee Assassijnen, één lot. De speler beleeft Ezio's laatste avontuur en volgt de voetsporen van zijn grote mentor, Altaïr, op een reis van ontdekking en onthulling in het 16e-eeuwse Constantinopel, in het hart van het Ottomaanse Rijk. De speler belichaamt Ezio, de bekendste en legendarische Assassijn van de Assassin's Creed-franchise, op zijn reis van jonge man tot legendarische leider van de broederschap van de Assassijnen en ontdekt de singleplayercampagnes evenals inhoud van de add-on van de driedelige spelcollectie. De drie klassiekers ontvouwen zich op actuele hardware in 1080p bij 30 FPS, waardoor het verhaal nog gedetailleerder wordt en de speler dieper in de geschiedenis en het leven van die tijd wordt getrokken. De grafische kwaliteit is herzien en de nabewerking is geoptimaliseerd. Alle drie de singleplayercampagnes en de bijbehorende singleplayer-inhoudspakketten bieden een dieper inzicht in Ezio's leven. Daarnaast zijn de volledige korte films Assassin's Creed Lineage en Assassin's Creed Embers inbegrepen.